血清 or 血漿？ELISA指標(biāo)檢測(cè)要怎么選？
全血、血漿、血清的區(qū)別 1. 血清多用于血液生化、**等方面的測(cè)定； 2. 血漿多用于凝血等方面的測(cè)定； 3. 全血?jiǎng)t多用在血細(xì)胞、血沉等方面的測(cè)定。 顏色 成分 血液 紅色 血細(xì)胞+血漿 血漿 淡黃色半透明 不含血細(xì)胞 含纖維蛋白原 血清 黃色透明 不含血細(xì)胞 不含纖維蛋白原
1. 血清多用于血液生化、**等方面的測(cè)定；
2. 血漿多用于凝血等方面的測(cè)定；
3. 全血?jiǎng)t多用在血細(xì)胞、血沉等方面的測(cè)定。
含纖維蛋白原
不含纖維蛋白原
小知識(shí)：血漿可以通過去除纖維蛋白原等凝血因子形成血清。
血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。
在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿*大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。
為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品。
[血清蛋白] 總蛋白、白蛋白、球蛋白、TTT、ZTT。
[有機(jī)鹽] 肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·凈化值。
[糖質(zhì)] 血糖、Glycohemoglopin。
[脂質(zhì)] 膽固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL膽固醇。
[血清酵素] GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脫水酵素)、淀粉酶、堿性碳酸酶、酸性碳酸酶、膽素脂酶、醛縮酶。
[色素] 膽紅素、ICG、BSP。
[電解質(zhì)] 鈉(Na)、鉀(K)、鈣(Ca)、氯(Cl)。
[**] 甲狀腺***、甲狀腺刺激***。
血漿是離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后，通過離心沉淀，所獲得的不含細(xì)胞成分的液體，其中含有纖維蛋白原（纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白，具有凝血作用），若向血漿中加入鈣離子，血漿會(huì)發(fā)生再凝固，因此血漿中不含游離的鈣離子。
[血漿蛋白] 血漿蛋白可分為白蛋白、球蛋白、和纖維蛋白原等幾種成分。
[非蛋白氮] 血中蛋白質(zhì)以外的含氮物質(zhì)，總稱非蛋白氮。主要是尿素，此外還有尿酸、肌酐、氨基酸、多肽、氨和膽紅素等。
[無機(jī)鹽] 血漿中的無機(jī)物，絕大部分以離子狀態(tài)存在。陽(yáng)離子中以Na+濃度*高，還有K+、Ca2+和Mg2+等，陰離子中以Cl-*多，HCO3-次之，還有HPO42-和SO42-等。
使用無熱原無內(nèi)**的試管或離心管采集血液樣本，將試管或離心管在室內(nèi)溫度下放置自然凝固（視室溫環(huán)境10分鐘到2小時(shí)不等）或4℃過夜，分離出血清，（建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面，使血清能更大程度的分離出來，），2-6℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，立即進(jìn)行測(cè)定，建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存，避免反復(fù)凍融，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉、枸櫞酸納或檸檬酸鈉作為抗凝劑，使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本，采集后30分鐘內(nèi)，混合10-20分鐘后，2-6℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清液（血漿），建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存，避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
血清、血漿分離過程中特別需要注意兩點(diǎn)：防止溶血和細(xì)胞混入。
1.快：血液環(huán)境的穩(wěn)定性與保存時(shí)間的長(zhǎng)短呈反比，細(xì)胞膜的穩(wěn)定性也在下降，在這種情況下，應(yīng)盡快開展血清、血漿的分離，并嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行，避免出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，血清、血漿分離后務(wù)必避免反復(fù)凍融。
2.慢：離心速度不能過快，過快的離心速度會(huì)造成紅細(xì)胞壓積，容易產(chǎn)生溶血。
3.冷：血液樣品如不能馬上進(jìn)行血清或血漿的分離，則盡量冷藏保存和運(yùn)輸，但是，**不能冷凍，否則血細(xì)胞會(huì)形成冰晶造成細(xì)胞破裂而溶血。
小知識(shí)： 1.抗凝劑選擇：不同的抗凝劑有其不同的分子構(gòu)型，會(huì)對(duì)血液中各細(xì)胞的細(xì)胞膜產(chǎn)生不同的作用，有的會(huì)增加細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，有的會(huì)降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，所以選擇一款合適的抗凝劑至關(guān)重要（檢測(cè)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對(duì)抗凝劑是否有特殊要求）。
2.樣品處理不當(dāng)?shù)奈：?/strong>：血液存放過程中溫度過高或反復(fù)凍融對(duì)細(xì)胞膜有很大的損害。溫度過高及反復(fù)凍融會(huì)使細(xì)胞膜上的結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)象發(fā)生改變，進(jìn)而造成細(xì)胞膜的彈性降低以致破解產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，所以用于分離血清、血漿的血液應(yīng)避免反復(fù)凍融。
1. 溶血：紅細(xì)胞的破裂會(huì)引起血漿成分的改變，對(duì)一些生化項(xiàng)目如谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、鉀的測(cè)定結(jié)果造成較大的影響。若進(jìn)行抗體類檢測(cè)本身血清的顏色會(huì)干擾到*終的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
2. 脂血：在運(yùn)用比色法和比濁法檢測(cè)的項(xiàng)目中，脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通過雙波長(zhǎng)進(jìn)行消除從而影響檢測(cè)結(jié)果。
3. 黃疸：黃疸的血清中含有膽紅素，若樣本放置時(shí)間過長(zhǎng)或通過氧化劑后膽紅素還可被氧化為膽綠素、膽褐素，這些色素在不同波長(zhǎng)范圍具有一定的光吸收，從而影響檢驗(yàn)結(jié)果。
常見的血液生化指標(biāo)：血糖(GLU)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、鎂、鈣等。
常見的**：睪酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、游離三碘甲腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)等。