多克隆抗體通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機(jī)體,由一個(gè)B**細(xì)胞接受該抗原所產(chǎn)生的抗體稱(chēng)之為
單克隆抗體(Monclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類(lèi)抗體。抗原刺激機(jī)體,產(chǎn)生**學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是**球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的**球蛋白就是抗體。
1.佐劑的類(lèi)型 目前實(shí)踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟
油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌、白喉?xiàng)U菌以及細(xì)小棒狀桿菌等。
⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)
羊毛脂 1 份
石蠟油 5 份
混合,高壓**后保存。用時(shí)加熱融化,冷卻至 50℃左右,加抗原進(jìn)行乳化處理。
⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA)
弗氏不完全佐劑 10ml
卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。
初次**時(shí),*好用弗氏完全佐劑,以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的**反應(yīng)。再次**時(shí),一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時(shí),一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾。
⑶ 脂質(zhì)體:是人工制備的類(lèi)脂質(zhì)的小球體,由一個(gè)或多個(gè)酷似細(xì)胞膜的類(lèi)脂雙分子層組成,這種結(jié)構(gòu)使其能夠攜帶各種親水的、疏水的和兩性物質(zhì),他們被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)部的水相中,或插入類(lèi)脂雙分子層或吸附、聯(lián)接在脂質(zhì)體的表面,起到明顯的**增強(qiáng)作用。
⑷ 油佐劑 :采用植物油和礦物油均可,包括豆油、花生油、油菜油等。目前應(yīng)用*廣的礦物油。 10 號(hào) 白油(石蠟油) 100ml
硬脂酸鋁 2g
司本 80 6ml
混合加熱融化,分裝。用時(shí)按下列配方進(jìn)行乳化。
油相 3 份
水相(加 4%吐溫-80) 1 份
先把油相攪拌起來(lái),然后緩慢加入水相乳化。司本是油分散劑,吐溫是水分散劑,均有利于乳化。