qpcr中Ct值的范圍
內(nèi)參*好在20以下,太大可能有降解
在保證沒(méi)有發(fā)生降解的情況下,不論不同組的內(nèi)參差異多大,也不影響*終的結(jié)果
30以上可不可以用還要看空白對(duì)照有沒(méi)有起峰,如果沒(méi)有起峰就可以用
什么標(biāo)本?如果內(nèi)參在26說(shuō)明降解太厲害了,或者是rna豐度太低
空白是不加模版的孔,其它試劑都要加,沒(méi)對(duì)引物都要做空白對(duì)照,否則你怎么判斷是否有污染,怎么判斷引物二聚體有沒(méi)有導(dǎo)致起峰
循環(huán)腫瘤細(xì)胞?還是血液系統(tǒng)的腫瘤細(xì)胞?提取rna的細(xì)胞數(shù)大概是多少?用試劑盒提取的rna還是trizol法?
空白孔必須每次擴(kuò)增都要做,不需要復(fù)孔,一對(duì)引物只要做一個(gè)孔即可。