細胞計數(shù)實驗

一、實驗目的

掌握細胞計數(shù)的方法和操作要領。

二、實驗用品

血球計數(shù)板、載玻片、蓋玻片、吸管、試管架、eppendorf管、吸頭、吸頭盒、普通顯微鏡、細胞懸液。

三、實驗方法

1. 取一副血球計數(shù)板，將計數(shù)板載玻片、蓋玻片洗干凈，擦干。將蓋玻片蓋在計數(shù)板上。

2. 取移液管一支，伸入培養(yǎng)瓶中，輕輕用移液管將細胞懸液混勻（反復吸放移液管橡膠頭），然后吸取少量懸液滴一滴于蓋玻片與計數(shù)板載玻片的邊緣上，利用溶液的虹吸現(xiàn)象，使其自動流入計數(shù)室內。懸液注入量不應過多或過少，計數(shù)室內不應有氣泡。滴液不當和產生大量氣泡，則須重新洗凈計數(shù)板，擦干后再次滴入細胞懸液，否則影響細胞計數(shù)。

3. 懸液滴入計數(shù)室后，靜置2～3分鐘，待細胞在計數(shù)室中下沉后，再在低倍鏡下觀察計數(shù)。依照白細胞計數(shù)法，數(shù)計數(shù)板四角的大方格內的細胞總數(shù)，計數(shù)時應循一定的路徑，以免遺漏或重復計數(shù)，對壓在格子線上的細胞，根據(jù)“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則進行計數(shù)。然后按下式計算出每毫升細胞懸液中的細胞數(shù)。

     細胞數(shù)/ml=(四大格中的細胞總數(shù)/4)x104

   每人至少重復計數(shù)2～3次，取其平均數(shù)。如細胞原液經(jīng)過稀釋，則稀釋液的細胞數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為細胞原液的細胞數(shù)。