腺苷干預(yù)人結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞RECK基因甲基化及其機(jī)制
李權(quán) 重慶醫(yī)科大學(xué) 摘要：目的：探討腺苷干預(yù)人結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞RECK基因甲基化及其機(jī)制。方法：分別用0,3.0 mmol/L的腺苷干預(yù)SW480細(xì)胞72 h后,亞硫酸氫鹽測序法(BSP)檢測RECK基因啟動子區(qū)CpG島甲基化情況；逆轉(zhuǎn)錄PCR、Western印跡法、流式細(xì)胞儀檢測腺苷處理前后RECK基因mRNA和蛋白的表達(dá)情況、甲基轉(zhuǎn)移酶(Methyltransferases DNMT1, DNMT3a)蛋白表達(dá)情況及細(xì)胞凋亡的變化。結(jié)果：(1)腺苷干預(yù)后RECK基因甲基化程度為49.14%±2.38%,明顯低于對照組(74.84%±2.38%,均P<0.01)；腺苷干預(yù)后RECK基因mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平、細(xì)胞凋亡水平均明顯高于對照組(0.3353±0.3502比0.0800±0.0036,0.6030±0.0178比0.0900±0.0030,27.90%±2.32%比5.09%±0.30%,均P<0.01)；甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT1, DNMT3a)蛋白表達(dá)情況均明顯低于對照組(0.1413±0.0021比0.6450±0.0092,0.1300±0.0046 比 0.5267±0.0095,均P<0.01)。結(jié)論：腺苷通過抑制甲基轉(zhuǎn)移酶的活性,降低RECK基因DNA啟動子區(qū)域的甲基化水平,使RECK基因mRNA及蛋白表達(dá)水平增加,促使SW480細(xì)胞凋亡。 關(guān)鍵詞：結(jié)直腸腫瘤; RECK基因; 腺苷; 甲基轉(zhuǎn)移酶; 細(xì)胞凋亡; 導(dǎo)師：王亞旭; 分類號：R735.34 文內(nèi)圖片： 圖３腺苦干預(yù)ＳＶＶ４８０細(xì)胞后蛋白表達(dá)情況Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔對各組細(xì)胞調(diào)ｔ的影響流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞調(diào)ｔ率顯示（ 圖４），３．０ｍｍｏｌ／Ｌ組干預(yù)ＳＷ４８０細(xì)胞 圖３腺苦干預(yù)ＳＶＶ４８０細(xì)胞后蛋白表達(dá)情況Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔對各組細(xì)胞調(diào)ｔ的影響流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞調(diào)ｔ率顯示（ 圖４），３．０ｍｍｏｌ
分類號：R735.34
文內(nèi)圖片： 圖３腺苦干預(yù)ＳＶＶ４８０細(xì)胞后蛋白表達(dá)情況Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔對各組細(xì)胞調(diào)ｔ的影響流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞調(diào)ｔ率顯示（ 圖４），３．０ｍｍｏｌ／Ｌ組干預(yù)ＳＷ４８０細(xì)胞 圖３腺苦干預(yù)ＳＶＶ４８０細(xì)胞后蛋白表達(dá)情況Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔對各組細(xì)胞調(diào)ｔ的影響流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞調(diào)ｔ率顯示（ 圖４），３．０ｍｍｏｌ
文內(nèi)圖片：
圖３腺苦干預(yù)ＳＶＶ４８０細(xì)胞后蛋白表達(dá)情況Ｆｉｇ．３ＴｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳＷ４８０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｖｅｎｅｄｂｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ２．４腺昔對各組細(xì)胞調(diào)ｔ的影響流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞調(diào)ｔ率顯示（
圖４），３．０ｍｍｏｌ／Ｌ組干預(yù)ＳＷ４８０細(xì)胞
圖４），３．０ｍｍｏｌ