產(chǎn)品及特點

本產(chǎn)品是在天澤基因一管式病毒DNAOUT的基礎上開發(fā)的、專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子（咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、**拭子等）中提取微量病毒DNA的產(chǎn)品，它具有下列特點：

1. 操作簡單，整個過程只需要20分鐘左右，不需要額外在洗柱液中補加乙醇。

2. 靈敏度高，通過PCR檢測到的*終靈敏度可以達到30-50拷貝/mL。

3. **無毒，不需要使用苯酚和氯仿等有機溶液。

4. 如果加上病毒離心富集步驟，*多可以處理1.5 mL液體病毒樣品。

5. 與PCR和熒光PCR兼容。

6. 價廉物美，性價比遠高于國外同類產(chǎn)品。

7. 適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細胞上清液等無細胞材料。

規(guī)格及成分

運輸及保存

常溫運輸及保存，有效期一年。

自備試劑

無，但需要自備RNase-free 的1.5 mL離心管（耗材）。

使用方法

1. 對于液體病毒樣品：在1.5 mL離心管中加入0.1-0.2 mL液體病毒樣品。如果病毒需要富集，可以將1.5 mL液體在4℃ 24,000 g冷凍離心60分鐘，移棄1.3 mL后剩下的0.2 mL用于第2步處理。

對于拭子樣品：將一個拭子放入離心管中，加入1mL自備的生理鹽水，振蕩器上充分振蕩半分鐘，然后轉移0.2 mL到1.5 mL塑料離心管中，用于第2步處理。

2. 加入0.6 mL溶液A到**步得到的0.2 mL樣品中，振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘。注意：溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。

3. 短暫離心后將500 uL溶液轉移到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。

4. 12,000 rpm室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

5. 將剩余溶液短暫離心后全部轉移到步驟3的離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。

6. 12,000 rpm室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

7. 加入0.7 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000 rmp室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

8. 12,000 rpm室溫離心1分鐘（干甩），棄含穿透液的離心管。

9. 將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的RNase-free 的1.5 mL離心管中，在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100 uL DNA洗脫液3.0，然后室溫放置2分鐘。

10. 12,000 rpm室溫離心1分鐘，離心管中的溶液即為病毒DNA溶液。

11. DNA樣品可以直接用于PCR，也可放-20℃長期保存。

相關資料

人類**相關DNA病毒

疑難解答

Q：提取液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難？

A：原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質保存，每個病毒*多只攜帶幾個拷貝(而一個細胞中有上萬種RNA分子，每種RNA有很多拷貝)，同時其長度也十分有限(一般不到細胞基因組的萬分之一)，樣品中病毒數(shù)往往又不是很多，使得樣品中病毒核酸的**量往往比一個細胞中核酸的**量還少，所以操作中十分容易丟失。另外，由于得到的核酸**量很少，不能使用電泳和測OD檢測，只能通過PCR或RT-PCR檢測，而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化，所以要確定提取是否成功十分不容易。

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柱式病毒RNAOUT（CAT#:71001）