非凍型血液RNA保存液
非凍型血液RNA保存液低于1.7,考慮RNA降解,*常見的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來不及也可以買現(xiàn)成的。
2.提取時注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時間不宜過長(一般不超過一個月)。
非凍型血液RNA保存液提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過程應(yīng)該盡量快,不要太過仔細,以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時要小心,離心管盡量不要抖動和傾斜,保持其從離心機里拿出來的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.非凍型血液RNA保存液干燥時不要太過
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個結(jié)果不是很準(zhǔn)確,因為在跑膠的過程當(dāng)中RNA也會降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,非凍型血液RNA保存液然后用管家基因檢測,只要能擴出明亮的條帶即對你的實驗沒有影響。注意:在用管家基因檢測時應(yīng)增加循環(huán)數(shù),以檢測是否有DNA污染。
XY8120720 柱式凍存血液DNAOUT 50次|250次 XY880805 柱式毛發(fā)DNAOUT 50次 XY8111201 痰液DNAOUT 50次 XY891102 柱式骨骼DNAOUT 50次 XY880801 柱式拭子DNAOUT 50次 XY860501 一管式拭子DNAOUT 20次|100次 XY870502 石蠟包埋組織DNAOUT 30次 XY870601 糞便DNAOUT 30次|100次 XY880102 柱式糞便DNAOUT 50次 XY8130812 凋亡DNAOUT 24次 XY880602 柱式凋亡DNAOUT 50次 XY890314 柱式尿液DNAOUT 50次 XY8121102 柱式鼠尾DNAOUT 50次 XY8130401 柱式海洋動物DNAOUT 50次 XY83672 植物DNAOUT 100次|250次 XY860602 柱式植物DNAOUT 50次 XY8130510 磁珠植物DNAOUT 50次 XY880925 大提柱式植物DNAOUT 4次