非凍型組織RNA保存液
非凍型組織RNA保存液低于1.7,考慮RNA降解,*常見的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來不及也可以買現(xiàn)成的。
2.提取時注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時間不宜過長(一般不超過一個月)。
非凍型組織RNA保存液提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過程應(yīng)該盡量快,不要太過仔細(xì),以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時要小心,離心管盡量不要抖動和傾斜,保持其從離心機(jī)里拿出來的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.非凍型組織RNA保存液干燥時不要太過
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個結(jié)果不是很準(zhǔn)確,因為在跑膠的過程當(dāng)中RNA也會降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,非凍型組織RNA保存液然后用管家基因檢測,只要能擴(kuò)出明亮的條帶即對你的實驗沒有影響。注意:在用管家基因檢測時應(yīng)增加循環(huán)數(shù),以檢測是否有DNA污染。
XY860705 一管式植物DNAOUT 50次|500次 XY860805 ***DNAOUT 20次|100次 XY8101116 柱式植物油DNAOUT 50次 XY8100932 溶壁酶(破壁酶)干粉 1g XY8100917 蝸牛酶干粉 5g XY8100919 消解酶(溶細(xì)胞酶)干粉 100mg XY860304 **DNAOUT 50次 XY870901 柱式**DNAOUT 50次 XY8100303 玻璃珠法柱式**DNAOUT 50次 XY880926 大提柱式**DNAOUT 4次 XY880803 柱式動物線粒體DNAOUT,PCR級 50次 XY8120501 柱式動物線粒體DNAOUT,測序級 15次 XY8130831 絲狀**線粒體DNAOUT 15次 XY8120406 柱式植物葉綠體DNAOUT 10次 XY8101101 線狀DNA**劑 30次 XY860707 **DNAOUT 50次|250次 XY860802 柱式**DNAOUT 50次(A)|50次(B) XY880927 大提柱式**DNAOUT 4次(A)|4次(B) XY860806 一步式**DNAOUT 50次