CREB調節(jié)轉錄輔激活因子3(CRTC3)重組蛋白
來源： 原核表達
宿主：E.coli
內**水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：Secreted
預測分子量：15.7kDa
實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag
緩沖液成份磷酸鹽緩沖液：（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度> 95%
等電點：5.5
應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白，請參見活性蛋白。
規(guī)格：10μg 50μg 200μg 1mg 1g
CREB調節(jié)轉錄輔激活因子3(CRTC3)重組蛋白實驗步驟：
1.設計目的重組蛋白質的N端10-15個氨基酸的簡并序列。
2.引物合成上述簡并序列，同時設計合成目的基因反向引物。
3.PCR擴展目的基因，這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列，同時不改變氨基酸序列。
4.雙酶切，插入到目標載體。
5.轉化。
6.挑選多個克隆（比如100-200個）到1.5ml EP管，直接誘導表達（記得帶上為改造克隆菌株的對照）。
7.SDS-PAGE檢測。
8.挑選高表達的多個克隆，測序。
CREB調節(jié)轉錄輔激活因子3(CRTC3)重組蛋白的表達策略優(yōu)點和缺點：
CREB調節(jié)轉錄輔激活因子3(CRTC3)重組蛋白分離純化原則總結：
1.應盡可能利用蛋白質不同物理特性選擇所用的分離純化技術，而不是利用相同技術多次純化；
2.不同的蛋白在性質上有很大區(qū)別，每一步純化步驟都應當充分利用目的蛋白和雜質成分物理性質差異；
3.在純化早期階段要盡量減少處理體積，方便后續(xù)純化；
4.在純化后期階段，再使用造價高的純化方法，有利于純化材料的重復使用，減少再生復雜性。
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