產(chǎn)品及特點(diǎn)

固相RNase**劑(Surface RNase Erasol)是天澤基因**開(kāi)發(fā)的特殊的RNase滅活劑。它含有多種成分，能高效滅活固體表面的RNase污染，保障RNA工作環(huán)境的清潔。

1. 高效。本產(chǎn)品原液能在5分鐘內(nèi)將固體表面的多達(dá)100 ug的RNase徹底滅活，效力和速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常用的DEPC。

2. 此外還能滅活RNase T1、 RNase H、BAL31、 S1、Mung bean nuclease等RNase和DNase。

3. 無(wú)毒。跟強(qiáng)致癌的DEPC不同，本產(chǎn)品對(duì)人體沒(méi)有任何毒害。

4. 使用簡(jiǎn)單。處理后不需要高壓**。

規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存，有效期兩年

自備試劑

蒸餾水

使用方法

水的處理

直接將固相RNase**劑原液按1:1000的比例加入到需要處理的水中，混合均勻后室溫放置24小時(shí)即可直接使用，得到的水可以配制電泳溶液和裂解液。但如果需要溶解RNA，建議使用液相RNase**劑（CAT#：3091）。

工作平臺(tái)的清潔：

直接將固相RNase**劑原液或10倍的新鮮稀釋液噴于臺(tái)面，5分鐘后用普通吸水紙擦凈，*后用沾有固相RNase**劑1000倍新鮮稀釋液的吸水紙擦凈，晾干。

注意：由于一般的工作平臺(tái)RNase污染都很?chē)?yán)重，天澤基因建議使用固相RNase**劑原液或十倍的新鮮稀釋液（新鮮稀釋液的存放時(shí)間不要超過(guò)**），不要使用稀釋度大于十倍的稀釋液。

實(shí)驗(yàn)儀器的清潔：

用浸有固相RNase**劑原液或10倍的新鮮稀釋液的紙擦拭儀器表面，再用吸水紙擦凈，*后用沾有固相RNase**劑1000倍新鮮稀釋液的吸水紙擦凈，晾干。用固相RNase **劑原液處理金屬器械的時(shí)間不能超過(guò)5分鐘。

注意：由于一般的實(shí)驗(yàn)儀器RNase污染都很?chē)?yán)重，天澤基因建議使用固相RNase **劑原液或十倍的新鮮稀釋液（新鮮稀釋液的存放時(shí)間不要超過(guò)**），不要使用稀釋度大于十倍的稀釋液。

玻璃和塑料器皿的清潔：

將器皿浸泡在固相RNase **劑的10或100倍的新鮮稀釋液中，靜置處理5分鐘后取出，再用固相RNase**劑1000倍或10000倍新鮮稀釋液浸泡二次以上，倒立晾干后備用。

注意：由于一般的清洗后的玻璃和塑料器皿的RNase污染都比較嚴(yán)重（但一般比工作平臺(tái)和實(shí)驗(yàn)儀器干凈），天澤基因建議**次浸泡使用固相RNase **劑的10倍或100倍新鮮稀釋液（新鮮稀釋液的存放時(shí)間不要超過(guò)**），不要使用稀釋度大于1000倍的稀釋液。

移液槍的清潔：

根據(jù)生產(chǎn)廠家的使用手卸下移液槍的前端，留下接口塞和圈套后將其浸放在固相RNase**劑的10或100倍的新鮮稀釋液中一分鐘，再用固相RNase**劑1000倍或10000倍新鮮稀釋液徹底沖洗后，晾干，裝回移液槍。

塑料離心管和滴頭的清潔:

將反應(yīng)塑料離心管和滴頭充分浸泡在固相RNase**劑的1000倍的新鮮稀釋液中5分鐘以上(*好不要有氣泡)， 然后再用固相RNase**劑1000倍或10000倍的新鮮稀釋液充分浸泡兩次，試管或離心管可立即使用或干燥后備用。

技術(shù)資料

如何檢測(cè)本產(chǎn)品滅活RNase的效果

在兩個(gè)1.5mL塑料離心管中分別加入RNase溶液，使RNase總量在10-100 ug之間，自然晾干（需要**左右）或加熱使水份蒸發(fā)，一個(gè)樣品加入1 mL 本產(chǎn)品原液，另一個(gè)樣品加入1 mL無(wú)RNase的水（對(duì)照），室溫靜置五分鐘（注意不要讓管壁上產(chǎn)生氣泡，因?yàn)樗鼤?huì)阻擋溶液與管壁上RNase分子的結(jié)合），然后小心吸出溶液并加入1 mL水，靜置1分鐘后小心吸出，重復(fù)水洗步驟一次，*后加入2.5 ug總RNA樣品， 37℃保溫30分鐘后加RNA電泳上樣液，電泳觀察RNA分子的完整性。完整的RNA表示該管中RNase已經(jīng)被滅活。

固相RNase **劑稀釋度與RNase的滅活效果的關(guān)系

表注：所有滅活條件均為室溫靜置放置5分鐘，“+”表示***滅活，“-”表示部分滅活或不能滅活。RNase為液體溶液加入到1.5 mL塑料離心管中晾干而得，稀釋液為新鮮稀釋。

相關(guān)資料

遠(yuǎn)離EPC的三大理由

1．DEPC對(duì)人體有害。DEPC為高活性烷化試劑，能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行共價(jià)修飾，使其組胺基團(tuán)的乙氧基甲酸化（RNase A活性位點(diǎn)有兩個(gè)組氨酸，故能被滅活）；同時(shí)它還能使RNA分子中沒(méi)配對(duì)的腺嘌呤羧甲基化，改變其活性，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)绊慠NA形成雜交雙鏈的能力。由于上述反應(yīng)沒(méi)有選擇性，故對(duì)人體十分有害，歸為強(qiáng)致癌物，使用時(shí)必須十分小心。

2．不能用DEPC處理下列溶液：一是含**胺的試劑，如MOPS，TRIS， HEPES，PBS等，因其所含**胺是DEPC攻擊的目標(biāo)，它們之間會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；二是不能高壓**的溶液（如DTT，dNTP，MgCl₂等），因?yàn)镈EPC必須通過(guò)高壓**去除；三是不能用于某些高濃度的溶液（如0.1 M NH₄Ac或NaAc），在這些溶液中DEPC的半衰期只有幾分鐘；四是不能用于pH值在4及以下的溶液，在此條件下DEPC對(duì)RNase沒(méi)有滅活作用；五是DEPC不能與Polycarbonate和Polystyrene等塑料材料接觸。

3．DEPC溶液不適合用于某些實(shí)驗(yàn)；一不能用于測(cè)OD，因?yàn)镺D讀數(shù)跟pH有關(guān)，DEPC在溶液中分解后變成乙醇和CO₂，部分CO₂與水反應(yīng)形成碳酸，導(dǎo)致pH降低，進(jìn)而降低OD值。二不能用于體外轉(zhuǎn)錄，Ambion報(bào)道0.1% DEPC-treated water能使轉(zhuǎn)錄效率降低40%，這可能與DEPC降解產(chǎn)物有關(guān)。

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品

液相RNase**劑(CAT#:3091)