一:用本產(chǎn)品保存新鮮組織樣品
1. 估計(jì)完全浸沒樣品所需要本產(chǎn)品的體積(1g 組織需10 mL)。
2. 標(biāo)記收集管并加入估計(jì)所需量的本產(chǎn)品。
3. 以*快速度將樣品剪切成厚度小于0.5 cm的碎塊。注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質(zhì)保護(hù)層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產(chǎn)品中保存,有蠟質(zhì)保護(hù)層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
4. 將組織碎塊完全浸沒于收集管的本產(chǎn)品中。
5. 將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤?,存放時(shí)間不能超過該溫度下的*長存放時(shí)間,如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在 4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到*后的溫度。注:將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護(hù)液。常見存放溫度與其*長存放時(shí)間關(guān)系為如下:
保存溫度
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時(shí)間及效果
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37℃
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**(保存三天的樣品 RNA 有部分降解)
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18-25℃
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一周(保存兩周的樣品 RNA 有輕微降解)
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2-8℃
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一個(gè)月
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-20℃和-80℃
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長期
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6. 從存放處取出樣品 (-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化),用消過毒的鑷子將組織碎塊從保護(hù)液中取出。
7. 立即開始RNA提取或進(jìn)行其他處理 (如將樣品分割成更小的碎塊再重新保存等)。注:樣品可以反復(fù)凍融二十次而其 RNA 質(zhì)量不會(huì)受到影響。
二:本產(chǎn)品保存培養(yǎng)細(xì)胞、懸浮細(xì)胞、**和RNA病毒
1. 標(biāo)記收集管。
2. 將待樣品轉(zhuǎn)移到離心管中,離心收集細(xì)胞,棄上清。注:處理含病毒的樣品(如
血漿)可直接從步驟第4步開始。
3. 用冰浴的緩沖液洗一次。
4. 將細(xì)胞懸浮在少量緩沖液中。
5. 加入五到十倍體積的本產(chǎn)品,混均; 對病毒樣品,加入兩到三倍體積的本產(chǎn)品,混均。
6. 將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤剑娣艜r(shí)間不能超該溫度下的*長存放時(shí)間。如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到*后溫度條件(將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護(hù)液)。注:樣品存放溫度與其*長存放時(shí)間關(guān)系為如下:
保存溫度
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時(shí)間及效果
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37℃
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**(保存三天的樣品 RNA 有部分降解)
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18-25℃
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一周(保存兩周的樣品 RNA 有輕微降解)
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2-8℃
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一個(gè)月
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-20℃和-80℃
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長期
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7. 取出樣品,室溫下融化(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化)。
8. 加入一倍體積的預(yù)冷的緩沖液 (如PBS),用常規(guī)離心法收集細(xì)胞并用緩沖液 洗一次。病毒樣品可免去此步驟。
9. 細(xì)胞直接用于RNA的提取或其他處理。
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